“穿戴好手部和面部的防護(hù)用品，我們打開(kāi)液氮罐，液氮?dú)饣纬傻陌嘴F從罐體開(kāi)口往下緩緩流淌。向罐體中看去，似乎能感受到接觸空氣的液氮液面正在巨大的溫差下沸騰。無(wú)數(shù)細(xì)胞就像生命的種子，在目光觸及不到的低溫液體內(nèi)沉睡。我們盡可能迅速的取出早已被標(biāo)記好的細(xì)胞凍存管。迅速水浴解凍后經(jīng)過(guò)一系列操作，細(xì)胞就完成了從休眠狀態(tài)到活躍狀態(tài)的轉(zhuǎn)換，此后我們只能祈禱蘇醒后的細(xì)胞們能盡快恢復(fù)正常的生命活動(dòng)?！?
細(xì)胞凍存液的門道
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)老手們都了解，細(xì)胞冷凍講究一個(gè)“慢凍速融”。傳統(tǒng)的操作流程是將細(xì)胞用凍存液重懸后分裝到凍存管內(nèi)，然后再緩慢的降溫到-80℃，而后轉(zhuǎn)入液氮罐長(zhǎng)期保存。其中凍存液的主要功能就是防止冷凍過(guò)程中形成會(huì)損傷細(xì)胞的冰晶，同時(shí)在長(zhǎng)期冷凍和解凍過(guò)程中為細(xì)胞提供支持成分。市面上有眾多商品化的細(xì)胞凍存液產(chǎn)品，而也有人在堅(jiān)持使用自行配制的凍存液。細(xì)胞凍存液真的會(huì)對(duì)細(xì)胞的保存和復(fù)蘇產(chǎn)生重要影響嗎？事實(shí)上，使用不同的凍存液保存細(xì)胞，其結(jié)果可能大不相同。
“原始”的細(xì)胞凍存液提示了哪些信息？
如果需要凍存的細(xì)胞屬于常用的細(xì)胞系，很多實(shí)驗(yàn)室會(huì)選擇自行配制凍存液來(lái)使用。典型的配方是在基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入5%到10%的DMSO（二甲基亞砜）和5%到40%的血清。甚至有90%血清+10%DMSO的配方。DMSO是一種滲透性保護(hù)劑，能夠降低細(xì)胞冰點(diǎn)，減少冰晶的形成，防止冷凍過(guò)程對(duì)細(xì)胞造成不可逆的機(jī)械性損傷。血清中的白蛋白是一種關(guān)鍵的組分，可在細(xì)胞周圍形成保護(hù)層。當(dāng)細(xì)胞開(kāi)始解凍時(shí)，血清也可以與釋放的毒素相結(jié)合。當(dāng)在營(yíng)養(yǎng)豐富的環(huán)境中被凍存，細(xì)胞也往往更容易在解凍后恢復(fù)狀態(tài)。除了DMSO和血清，凍存液中通常含有的基礎(chǔ)培養(yǎng)基也有維持滲透壓、補(bǔ)充血清中含量不足的某些營(yíng)養(yǎng)成分等作用。
這些成分的組合使自配的凍液具備了保護(hù)細(xì)胞免受冰晶損傷、營(yíng)養(yǎng)支持和化學(xué)性保護(hù)等基本功能，使得細(xì)胞長(zhǎng)期冷凍保存成為可能。但是，細(xì)心的你會(huì)發(fā)現(xiàn)：自行配制的凍存液用于凍存某些敏感的細(xì)胞（如干細(xì)胞等）后很難正常復(fù)蘇，甚至部分生命力旺盛的細(xì)胞系在復(fù)蘇后也會(huì)出現(xiàn)形態(tài)和增殖速度方面的問(wèn)題。這會(huì)和凍存液有關(guān)嗎？
自配的凍存液有哪些潛在風(fēng)險(xiǎn)？
自配的培養(yǎng)液幾乎都會(huì)含有血清和DMSO這兩種物質(zhì)。血清，我們知道它實(shí)際上是一種來(lái)自動(dòng)物體內(nèi)的天然復(fù)合物，其批次間差異不可能完全避免。解凍后細(xì)胞的活力可能因凍存液中血清批次的不同而有差異。相比于永生化的細(xì)胞系，原代細(xì)胞更敏感從而更容易受到這方面影響。對(duì)于多能干細(xì)胞（PSC），血清中的某些成分可能導(dǎo)致它們分化，并且不是朝著你期望的方向。DMSO雖然在一定條件下能保護(hù)細(xì)胞，但它本身是有毒的，同時(shí)DMSO也會(huì)改變生物膜對(duì)電解質(zhì)、藥物、毒物和代謝產(chǎn)物的通透性。一些脆弱的細(xì)胞也會(huì)因?yàn)镈MSO的存在更難以在復(fù)蘇后恢復(fù)狀態(tài)。雖然自配的凍存液相對(duì)廉價(jià)，但因?yàn)殚L(zhǎng)期實(shí)驗(yàn)的可靠性需求，以及凍存中的細(xì)胞庫(kù)的寶貴性，越來(lái)越多的細(xì)胞培養(yǎng)人員會(huì)更傾向于使用可靠的商品化細(xì)胞凍存液。
有沒(méi)有可靠的商品化凍存液選擇？
為了幫助更多用戶解決細(xì)胞凍存過(guò)程中的麻煩，依科賽推出了一系列化學(xué)成分明確、經(jīng)過(guò)嚴(yán)密的性能驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的即用型細(xì)胞凍存液產(chǎn)品。
OptiVitro 無(wú)蛋白,CD細(xì)胞凍存液
Cat#UC000-N011、UC000-N021
適用于：多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞低溫冷凍保存的即用型凍存液，無(wú)外源污染風(fēng)險(xiǎn)。
二、經(jīng)典款
OptiVitro 無(wú)血清細(xì)胞凍存液Cat#VUC00-N011
適用于：多種哺乳動(dòng)物細(xì)胞低溫冷凍保存的即用型凍存液，普適性更強(qiáng)。
三、無(wú)DMSO款
OptiVitro 無(wú)DMSO細(xì)胞凍存液Cat#UC000-N031
適用于：包括多種干細(xì)胞在內(nèi)的貼壁細(xì)胞凍存的即用型細(xì)胞凍存液。
產(chǎn)品信息
